Cellufine™ MAX GS
Bộ trao đổi cation mạnh với mật độ phối tử được tối ưu hóa cho các sản phẩm dược phẩm kháng thể, vv
Cellufine™ MAX S-r,S-h
Giới thiệu chất trao đổi cation mạnh với nhóm axit sulfonic
Cellufine™ MAX Q-r,Q-h
Giới thiệu chất trao đổi anion mạnh với nhóm amoni bậc bốn
Cellufine™ MAX CM
Giới thiệu chất trao đổi cation yếu với nhóm carboxymethyl
Cellufine™ MAX DEAE
Giới thiệu chất trao đổi anion yếu với nhóm diethylaminoethyl
Dòng Cellufine™ MAX là chất mang sắc ký thế hệ thứ hai của Cellufine™ có thể được sử dụng ở tốc độ dòng cao hơn Bộ trao đổi ion Cellufine™ MAX tiếp tục sử dụng công nghệ biến đổi bề mặt, cho phép sử dụng ở tốc độ dòng chảy cao và có hiệu suất hấp phụ động cao Nó có thể được sử dụng như một chất mang sắc ký hiệu năng cao và có thể được kỳ vọng sẽ tăng thông lượng của quy trình tiếp theoCó bốn loại thiết bị trao đổi ion Cellufine™ MAX: trao đổi cation mạnh (S, GS), trao đổi anion mạnh (Q), trao đổi cation yếu (CM) và trao đổi anion yếu (DEAE)
Chất mang cơ sở Cellufine™ MAXNhựa nền Cellufine™ MAX
Cellulose là một polysaccharide tồn tại trong tự nhiên và có cấu trúc phân tử tinh thể khác với các polysaccharide vô định hình như agarose Cellufine™, được làm từ cellulose, có cấu trúc lỗ độc đáo như trong Hình 1 Hơn nữa, dòng Cellufine™ MAX có kích thước lỗ lớn hơn các sản phẩm Cellufine™ trước đây Có thể thấy điều này khi so sánh các đường cong đột phá sử dụng thyroglobulin phân tử lớn trong Hình 2, cho thấy bộ trao đổi ion Cellufine™ MAX cho phép ngay cả các protein có trọng lượng phân tử lớn di chuyển hiệu quả bên trong các lỗ của chất mang
Cấu trúc của thiết bị trao đổi ion Cellufine™ MAXCấu trúc một phần của phương tiện Cellufine™ MAX IEX
Cấu trúc phối tử cho từng loại thiết bị trao đổi ion Cellufine™ MAX được thể hiện trong Hình 3 Các loại có sẵn tương thích với tất cả bốn chế độ sắc ký trao đổi ion (trao đổi cation mạnh = S, trao đổi anion mạnh = Q, trao đổi cation yếu = CM, trao đổi anion yếu = DEAE) Cellufine™ MAX S và Q có hai loại: loại h và loại r Loại h được thiết kế cho khả năng hấp phụ cao và loại r cho hiệu suất tách cao
Tính năng của bộ trao đổi ion Cellufine™ MAXĐặc điểm của phương tiện Cellufine™ MAX IEX
Các đặc tính của bộ trao đổi ion Cellufine™ MAX được thể hiện trong Bảng 1 Kích thước hạt trung bình xấp xỉ 90 μm và các hạt cellulose có liên kết ngang cao mới được phát triển cho dòng Cellufine™ MAX được sử dụng làm chất mang cơ bản Hơn nữa, bề mặt hạt được biến đổi bằng dextran để có khả năng hấp phụ cao Cả hai loại đều được thiết kế để tối ưu hóa cho quy trình sản xuất dược phẩm sinh học
| Loại | MAX CM | MAX S-r | MAX S-h | MAX DEAE | MAX Q-r | MAX Q-h | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Vật liệu cơ bản | Các hạt xenlulo liên kết ngang với dextran biến tính trên bề mặt | ||||||
| Kích thước hạt (μm) | 40 - 130 | ||||||
| Nhóm chức năng | CM | S | S | DEAE | Q | Q | |
| Khả năng trao đổi ion (meq/ml-gel) | 0.09 - 0.22 | 0.09 - 0.21 | 0.10 - 0.22 | 0.12 - 0.22 | 0.10 - 0.20 | 0.13 - 0.22 | |
| 10% DBC (mg/ml) | Lysozyme | 220 | 144 | 191 | |||
| Albumin huyết thanh bò | 197 | 141 | 225 | ||||
| Human-γ-globulin | 104 | 131 | 216 | 108 | 74 | 135 | |
| độ ổn định pH | 2 -13 | 2 -13 | 3 -14 | 2 -12 | 2 -12 | 2 -12 | |
| Chất bảo quản | 20% Ethanol | ||||||
Khả năng chịu áp suất đối với tốc độ dòng của bộ trao đổi ion Cellufine™ MAXThuộc tính dòng áp suất của Cellufine™ MAX IEX Media
Cellufine™ MAX có thể được sử dụng ở tốc độ dòng chảy cao để vận hành hiệu quả các quy trình sinh học Hình 4 cho thấy mối quan hệ giữa vận tốc tuyến tính và áp suất trong cột tỷ lệ thí điểm (cột có đường kính trong 30 cm, chiều cao đáy 20 cm) Tất cả các loại đều có đủ khả năng chịu áp lực ở tốc độ tuyến tính 500 cm/h
- Cột
- Đường kính trong 30 cm x cao 20 cm
- Pha di động
- Nước tinh khiết (20°C)
Khả năng hấp phụ động của bộ trao đổi ion Cellufine™ MAXKhả năng liên kết động của Cellufine™ MAX IEX Mediae
Một trong những tính năng của bộ trao đổi ion Cellufine™ MAX là đặc tính truyền khối hiệu quả cho các chất mục tiêu Đặc tính này cho phép đạt được khả năng hấp phụ động cao (DBC) ngay cả với thời gian lưu ngắn Hình 5 đến Hình 7 cho thấy ảnh hưởng của DBC và thời gian lưu đối với từng loại protein mẫu Có thể khẳng định rằng tất cả các loại đều có khả năng hấp phụ đủ ngay cả với thời gian lưu ngắn Ngoài ra, Hình 8 còn thể hiện sự so sánh về khả năng hấp phụ giữa Cellufine™ MAX S và các sản phẩm của các công ty khác Có thể khẳng định rằng Cellufine™ MAX S có khả năng hấp phụ tuyệt vời đối với tất cả các loại protein
- Cột
- Đường kính trong 5 mm x cao 50 mm
- Mẫu
- IgG đa dòng ở người (1 mg/ml)
- Bộ đệm hấp phụ
- 10mM Acetate-50mM NaCl (pH 4,3)
- Cột
- 5 mm ID×100 mm L
- Mẫu
- Albumin huyết thanh bò (1 mg/ml)
- Bộ đệm hấp phụ
- 50 mM Tris-HCl (pH 8,5)
- Cột
- đường kính trong 5 mm x chiều cao 50 mm
- Mẫu
- MAX CM IgG đa dòng ở người (1 mg/ml)Albumin huyết thanh bò MAX DEAE (1 mg/ml)
- Bộ đệm hấp phụ
- MAX CM 10mM Acetate (pH 5,6)MAX DEAE Tris-HCl (pH 8,5) cho BSA
- Tốc độ dòng chảy
- Thời gian cư trú 1 phút
- IgG đa dòng
- 10mM Acetate (pH 4,3) - 50mM NaCl
- Albumin huyết thanh bò
- 10mM Acetate (pH 4,3) - 50mM NaClLysozyme: Tris-HCl (pH 9,5)
Khả năng tách của chất trao đổi ion Cellufine™ MAX đối với protein mô hìnhHiệu suất tách protein mẫu cho phương tiện Cellufine™ MAX IEX
Một ví dụ về tách protein mô hình bằng cách sử dụng từng loại thiết bị trao đổi ion Cellufine™ MAX được hiển thị trong Hình 9 và 10 Có thể khẳng định khả năng hấp phụ cao và khả năng phân tách cao của từng loại
- Cột
- Đường kính trong 6,6 mm x cao 50 mm
- Bộ đệm A
- Bộ đệm photphat 10 mM (pH 7)
- Bộ đệm B
- Dung dịch đệm photphat 110 mM (pH 7) + 1 M NaCl(0→50% độ dốc tuyến tính)
- Tốc độ dòng chảy
- 0,86 ml/phút (thời gian lưu trú: 2 phút)
- Đạm
- Ribonuclease A (5 mg/ml),Cytochrome C (2,5 mg/ml),Lysozyme (1,5 mg/ml)
- Lượng tiêm
- 1,5ml
- Cột
- 6,6 mm ID×50 mm L
- Bộ đệm A
- 50 mM Tris-HCl (pH 8,5)
- Bộ đệm B
- 50 mM Tris-HCl (pH 8,5), NaCl 1 M(0→75% độ dốc tuyến tính)
- Tốc độ dòng chảy
- 0,86 ml/phút (thời gian lưu trú 2 phút)
- Đạm
- Transferrin (5 mg/ml),Albumin huyết thanh bò (10 mg/ml),Pepsin (5 mg/ml)
- Lượng tiêm
- 1,5ml
Tính ổn định hóa học và làm sạch tại chỗTính ổn định hóa học và làm sạch tại chỗ
Xenlulo là chất ổn định về mặt hóa học và vật lý Cellufine™, dựa trên cellulose, có khả năng kháng axit và kiềm cao và có thể chịu được CIP với dung dịch NaOH 0,5 M Sau khi sử dụng nhựa, rửa sạch và bảo quản trong dung dịch etanol 20% ở nhiệt độ phòng (dưới 25°C)
Cellufine™ MAX GSlà vật liệu đóng gói sắc ký trao đổi cation mạnh mới với nồng độ phối tử được tối ưu hóa Hiệu suất tuyệt vời trong việc loại bỏ các tập hợp khỏi kháng thể đơn dòng
Đặc điểm của Cellufine™ MAX GSĐặc điểm của Cellufine™ MAX GS Media
Các tính năng cơ bản của Cellufine™ MAX GS được trình bày trong bảng Chất mang bazơ là các hạt cellulose có liên kết ngang cao (kích thước hạt trung bình 90 um)
| Nhà cung cấp dịch vụ cơ sở | Các hạt cellulose có liên kết ngang cao |
|---|---|
| kích thước hạt | 40～130μm |
| phối tử | －R-SO3-Na+ |
| Khả năng trao đổi ion (m mol / ml) | 0.09〜0.15 |
| Lượng hấp phụ lysozyme (mg/ml) | ≧ 100 |
| Lượng hấp phụ động IgG đa dòng ở mức đột phá 10% (mg / ml) | ≧ 70 |
| Áp suất vận hành | < 0,3 MPa |
| độ ổn định pH | pH 2 ~ 13 |
Đặc tính vận tốc dòng chảy của Cellufine™ MAX GSĐặc tính dòng áp suất của Cellufine™ MAX GS
Cellufine™ MAX GS được đóng gói vào cột có đường kính trong 30 cm x cao 20 cm và đo độ giảm áp suất (Hình 1) Nó cho thấy các đặc tính tốc độ dòng chảy tốt có thể được sử dụng ở quy mô công nghiệp
- Cột
- Đường kính trong 30 cm x cao 20 cm
- Pha di động
- Nước tinh khiết (24°C)
Khả năng tách của protein mô hìnhHiệu suất tách protein mẫu cho Cellufine™ MAX GS
Cellufine™ MAX GS thể hiện hiệu suất tuyệt vời trong việc loại bỏ các tập hợp kháng thể bằng cách thay đổi nồng độ NaCl hoặc điều kiện pH Hình 2 so sánh sự phân tách các monome kháng thể và tập hợp bằng cách sử dụng chất mang có sẵn trên thị trường và Cellufine™ MAX GS Đặc điểm phân tách của các khối tổng hợp được đánh giá bằng phương pháp rửa giải gradient NaCl bằng cách sử dụng kháng thể đa dòng trong Hình 2a và kháng thể đơn dòng trong Hình 2b Cellufine™ MAX GS có thể loại bỏ hiệu quả các tập hợp khỏi kháng thể đơn dòng
- Mẫu
- IgG đa dòng biến tính do axit/nhiệt
- Bộ đệm
- Axit axetic (pH5,0), 50mM →1 M NaCl
- Lượng tiêm
- 1ml
- Nồng độ IgG đa dòng
- 2 mg/ml
- Cột
- Đường kính trong 5 mm x cao 50 mm
- Bộ đệm
- Bộ đệm citrate (pH 5,0)
- Độ dốc NaCl
- 0,2→0,5 M
- Lượng tiêm kháng thể đơn dòng
- 1ml
- Tốc độ dòng chảy
- 0,66 ml/phút
Lượng hấp phụ động của Cellufine™ MAX GSKhả năng liên kết động của Cellufine™ MAX GS
Cellufine™ MAX GS sử dụng chất mang có tốc độ khuếch tán lỗ rỗng cao nên thể hiện khả năng hấp phụ động (DBC) tuyệt vời Trong Hình 3, chúng tôi đã đánh giá lượng hấp phụ động của IgG đa dòng trong các điều kiện khác nhau với tốc độ dòng chảy (thời gian lưu trú) khác nhau Những đặc điểm này làm cho nó trở thành chất mang phù hợp cho các quá trình tiếp theo của thuốc kháng thể
- Điều kiện
- Cột
- Đường kính trong 5 mm x cao 5 cm
- Nồng độ IgG đa dòng
- 1 mg/ml
- Bộ đệm hấp phụ
- axit axetic 10mM (pH 5,0) + 50mM NaCl
- Cellufine™ MAX S-r, S-h
- Cellufine™ MAX GS
- Cellufine™ MAX Q-r, Q-h
- Cellufine™ MAX CM
- Cellufine™ MAX DEAE
