Cellufine™ GH-25
Để khử muối, loại bỏ cồn và loại bỏ chất hoạt động bề mặt khỏi mẫu
Cellufine™ GH-25 là cột khử muối dựa trên các hạt cellulose hình cầu Trọng lượng phân tử giới hạn loại trừ là 3kDa, do đó protein không đi vào lỗ chân lông và chảy ra ngoài hạt Mặt khác, muối và chất hoạt động bề mặt có trọng lượng phân tử nhỏ và đi vào lỗ chân lông và được rửa giải khỏi cột muộn hơn protein Do đó, nó có thể được sử dụng phù hợp để thay thế bộ đệm, vv Vì nó được làm từ các hạt cellulose có độ bền cơ học cao nên nó có thể được vận hành ở tốc độ dòng chảy cao Nó cũng có thể được sử dụng với các cột lớn Những tính năng này góp phần rút ngắn thời gian thực hiện trong thiết kế quy trình
Tính năngTính năng
- Các hạt cellulose hình cầu có độ bền cơ học cao
- Lý tưởng để thay thế bộ đệm cho mẫu mục tiêu
- Vì nó duy trì đặc tính ưa nước của polysacarit nên nó có đặc tính hấp phụ ít không đặc hiệu hơn
- Không cần thao tác trương nở vì nó được cung cấp ở trạng thái trương nở
- Có thể hoạt động ở pH 1-14 (HCl 0,1M, NaOH 0,5M)
- kháng dung môi hữu cơ
- Có thể tiệt trùng trong nồi hấp
Lợi íchLợi ích
- Có thể hoạt động ở tốc độ dòng chảy cao, giảm thời gian hoạt động
- Bạn có thể tải mẫu lớn Thời gian hoạt động điển hình là 5-30 phút Mẫu có thể được nạp tới 35% thể tích cột
- Khả năng hấp phụ mẫu không đặc hiệu thấp và hiệu suất phục hồi mẫu tuyệt vời
- Bộ phận mang hình cầu và có thể nén thực sự giúp việc đóng gói trở nên dễ dàng
- Có thể loại bỏ nội độc tố bằng cách làm sạch đơn giản
- Có thể được sử dụng trong các điều kiện dung môi và đệm thông thường mà không làm thay đổi hình dạng chất mang
- Có thể khử trùng bằng nồi hấp
| Tính năng | |
|---|---|
| Vật liệu cơ bản | Hạt xenlulo |
| kích thước hạt | ca 40 – 130 µm |
| Trọng lượng phân tử giới hạn loại trừ | 3kD |
| Khả năng lặp lại | Tỷ lệ phục hồi 98% đến 100% Không thấy hiệu suất giảm sút ngay cả sau khi sử dụng lặp lại 1000 lần trong 250 ngày |
| Nồi hấp | 121 °C, 30 phút |
| Áp suất làm việc | Có sẵn ở tốc độ dòng chảy 870 ml/h/cm2(khi sử dụng cột lớn) |
| độ ổn định pH | pH 1 – 14 |
| Tính ổn định hóa học | Có thể sử dụng mà không gặp vấn đề gì ngay cả với các mẫu chứa chất hoạt động bề mặt và chất biến tính Không thấy sự suy giảm chất lượng ngay cả sau 30 ngày ngâm trong HCl 0,1M hoặc NaOH 0,1M |
| Giải pháp bảo quản | dung dịch nước ethanol 20% |
Đặc tính vận tốc dòng chảyThuộc tính luồng
Cellufine™ GH-25 có độ bền cơ học cực caoSo với các chất mang dextran có bán trên thị trường, người ta nhận thấy khả năng chịu áp suất gần gấp đôi
Đặc tính tách của Cellufine™ GH-25Đường cong lựa chọn cụ thể của Cellufine™ GH-25
1:Ethylene glycol (MW62), 2:PEG (MW200), 3:PEG (MW400), 4:PEG (MW600), 5:PEG (MW1000), 6:PEG (MW3000), A:Glycine (MW75), B: Glycine x2 (MW132), C: Glycine x3 (MW189), D: Glycine x4 (MW246), E: Canxi pantothenate (MW477), F: Vitamin B12 (MW1,355), G: Chuỗi Insulin β (MW3,495)
Cellufine™ GH-25 có kiểu tách độc đáo Như bạn có thể thấy từ mối quan hệ giữa trọng lượng phân tử và Kav trong sơ đồ trên, sự khác biệt về Kav giữa trọng lượng phân tử 1000 và 3000 là rất lớn Điều này cho thấy cực kỳ thuận lợi trong việc tách các hợp chất có phân tử thấp có trọng lượng phân tử từ 1000 trở xuống và các hợp chất có phân tử cao như protein
Ví dụ ứng dụngỨng dụng
- Khử muối trước khi đông khô và cô đặc mẫu
- Trao đổi bộ đệm
- Loại bỏ cồn và dung môi hữu cơ
- Loại bỏ các thành phần có hại như phenol sau khi tinh chế vectơ
- Loại bỏ chất tẩy rửa dùng để hòa tan protein (Triton® X-100, SDS)
- Loại bỏ thuốc thử chaotropic (urê, guanidine, vv)
Hiệu suất khử muối nhanh chóngKhử muối tốc độ cao
Cellufine™ GH-25 có độ bền cơ học cao, lý tưởng để sử dụng với các cột lớn Vì nó có thể được sử dụng với các cột lớn nên có thể đạt được các hoạt động khử muối tuyệt vời
Khử muối từ proteinKhử muối protein
Chúng tôi đã cố gắng khử muối nhiều loại protein bằng Cellufine™ GH-25 Sự phân tách protein và natri clorua cực kỳ sắc nét và tỷ lệ thu hồi gần 100%
- Cột
- H26cm x H60cm Vt = 318ml
- Pha di động
- 0,05 M amoni formate
- Tốc độ dòng chảy
- 36 ml/giờ, 6,8 cm/giờ
- Mẫu
- (Ⅰ) BSA 30 mg, NaCl 150 (Ⅱ) 300 mg, NaCl 1500 mg
- Số tiền nạp
- (Ⅰ) 2ml (Ⅱ) 8ml
- Cột
- H16cm x H52cm Vt = 104ml
- Pha di động
- 0,05 M amoni formate
- Tốc độ dòng chảy
- 42 ml/giờ, 21 cm/giờ
- Mẫu
- Lysozyme 30 mg Natri clorua 150 mg
- Số tiền nạp
- 2ml
- Cột
- H15cm x H49 cm Vt = 86 ml
- Pha di động
- 0,05 M amoni formate
- Tốc độ dòng chảy
- 30 ml/giờ, 17 cm/giờ
- Mẫu
- Các loại protein 50 mg, NaCl 250mg
- Số tiền tải
- 2ml
Loại bỏ rượuLoại bỏ rượu
Ethanol được loại bỏ khỏi albumin thu hồi từ máu bằng phương pháp phân đoạn ethanol của Cohn Bảng 1 thể hiện sự so sánh việc nạp mẫu vào Cellufine™ GH-25 ở các tốc độ dòng khác nhau Ngay cả khi tốc độ dòng thay đổi, không có sự thay đổi nào được quan sát thấy về hiệu suất loại bỏ cồn hoặc lượng albumin được thu hồi Tải ở tốc độ dòng chảy cao giúp rút ngắn thời gian thực hiện
| Số chạy | 1 | 2 |
|---|---|---|
| Tên sản phẩm | GH-25 | GH-25 |
| Đường kính trong của cột (mm) | 50 | 50 |
| Chiều cao cột (mm) | 680 | 670 |
| Thể tích cột (ml) | 1335 | 1320 |
| Tốc độ dòng chảy (ml/giờ) | 570 | 2010 |
| Tốc độ tuyến tính (ml/h/cm²) | 29 | 102 |
| Thời gian chu kỳ (giờ) | 2.3 | 0.6 |
| Thuộc tính mẫu | ||
| Lượng tải (ml) | 310 | 310 |
| Lượng tải (% Vt) | 23 | 23 |
| Nồng độ albumin (%) | 12 | 12 |
| Nồng độ Ethanol (%) | 4.8 | 4.8 |
| Mẫu được sưu tầm | ||
| Thể tích chất lỏng thu được (ml) | 546 | 525 |
| Tỷ lệ pha loãng | 18x | 17x |
| Tỷ lệ dư lượng Ethanol (%) | 0.002 | 0.01 |
| Tỷ lệ thu hồi album (%) | 97 | 98 |
Bảng 1Loại bỏ ethanol khỏi phần albumin của con người
Khử muối ở quy mô công nghiệpKhử muối công nghiệp
Cellufine™ GH-25 có độ bền cơ học cao và có thể được sử dụng ở quy mô công nghiệp
Chúng tôi sẽ giới thiệu ví dụ về khử muối thể tích mẫu 225L/ngày bằng cách đóng gói Cellufine™ GH-25 vào cột lớn (105 x 587 mm, 5L) Cellufine™ GH-25 có độ bền cơ học cao và có thể được xử lý ở tốc độ dòng chảy cao 1250 ml/phút Thời gian chu kỳ là 8 phút/mẻ Lượng nạp mẫu là 25% thể tích chất mang
| Đóng gói | Cellufine™ GH-25 |
|---|---|
| Cột (mm) | 105 x 587 |
| Số cột | 5,1 lít |
| Tốc độ dòng chảy (ml/phút)(lít/giờ) | 1250(75 lít/giờ) |
| Tốc độ tuyến tính | 870 ml/h/cm² |
| Đặc tính mẫu trước khi chất lỏng đi qua | 5% khối lượng/thể tích protein trong 1,5M NaCL |
| Lượng tải mẫu | 1,27 L (25% thể tích cột) |
| Sản lượng/Chu kỳ | 63,6g |
| Số chu kỳ/ngày | 180 |
| Số lượng mẫu/ngày | 11,4kg |
| Tỷ lệ phục hồi mẫu | 99.5 % |
| Tỷ lệ loại bỏ bộ đệm | 99 % (0,015M kết quả cuối cùng) |
| Hệ số pha loãng mẫu | 1.13 |
| Lượng chất lỏng sau khi thu thập/ngày | 257 lít |
| Tổng công suất xử lý mỗi ngày | 225 lít |
Bảng 2Ví dụ về xử lý mẫu ở quy mô công nghiệp
- Cellufine™ GH-25
