Cellufine™ ET Clean
Vật liệu đóng gói sắc ký ái lực ET Clean để loại bỏ nội độc tốGiới thiệu
Cellufine™ ET Clean là vật liệu đóng gói sắc ký có poly-ε-lysine cố định trên các hạt cellulose hình cầu Nội độc tố có thể được loại bỏ một cách hiệu quả khỏi dung dịch mẫu mục tiêu Poly-ε-lysine là một polyme 25-35 ε-lysine và là sản phẩm lên men thu được từ Streptomyces albulus Polylysine được sử dụng làm chất bảo quản thực phẩm và là phối tử có độ an toàn cao
Cellufine™ ET Clean được phát triển với sự cộng tác của Đại học Kumamoto Poly-ε-lysine được cố định ổn định trên các hạt xenlulo Do đó, nó thể hiện sự ổn định tuyệt vời trước các hóa chất thông thường được sử dụng trong quá trình làm sạch tại chỗ (CIP), chẳng hạn như NaOH 0,2M
Cellufine™ ET Clean có thể loại bỏ hiệu quả lipopolysacarit do vi khuẩn gram âm như Escherichia coli tạo ra, ngay cả trong các điều kiện như nước muối sinh lý Vì nội độc tố không giải hấp ngay cả trong điều kiện nồng độ muối cao nên nó có thể được sử dụng phù hợp khi muốn loại bỏ nội độc tố khỏi protein Poly-ε-lysine là một phối tử có ái lực, nhưng không giống như protein, nó không bị bất hoạt trong điều kiện khắc nghiệt
Cấu trúc của Cellufine™ ET CleanCấu trúc một phần
Tính năng của ET CleanĐặc điểm
| Tên sản phẩm | Giải pháp bảo quản | Đường kính trung bình | Kích thước lỗ chân lông* |
|---|---|---|---|
| Cellufine™ ET Clean S | dung dịch nước ethanol 20% | ca 40-130 mm | Mlim 2000 |
| Cellufine™ ET Clean L | dung dịch nước ethanol 20% | ca 40-130 mm | >Mlim2x106 |
*Kích thước lỗ rỗng được tính toán bằng phân tích lọc gel sử dụng pullulan và maltose với các trọng lượng phân tử khác nhau làm chất chỉ thị
Hấp phụ chọn lọc nội độc tố từ albumin huyết thanh bò (BSA)Hấp phụ chọn lọc nội độc tố (LPS) từ dung dịch albumin huyết thanh bò (BSA) bằng hạt sạch Cellufine™ ET
2 mL mẫu (BSA: 500 μg/ml, E coli O111: B4 LPS: 100 ng/ml, pH 7,0, cường độ ion μ = 0,05-0,8) được thêm vào 0,2 g chất mang ướt, khuấy và đo lượng nội độc tố trong phần nổi phía trên mẫu
Có thể loại bỏ nội độc tố khỏi nhiều loại protein một cách hiệu quảLoại bỏ có chọn lọc nội độc tố khỏi dung dịch protein bằng hạt sạch Cellufine™ ET
| Mẫu | Cellufine™ ET Clean S | Cellufine™ ET Clean L | |||
|---|---|---|---|---|---|
| Đạm (pI) | Lượng nội độc tố trước khi loại bỏ (pg/ml) | (0,02M PB, pH7,0, μ=0,0) | (0,02M PB + 0,36M NaCl, pH7,0, μ=0,40) | ||
| Lượng nội độc tố sau khi loại bỏ (pg/ml) | Tỷ lệ thu hồi protein (%) | Lượng nội độc tố sau khi loại bỏ (pg/ml) | Tỷ lệ thu hồi protein (%) | ||
| Ovalbumin(46) | 28,000 | 81 | 99 | <10 | 95 |
| BSA(49) | 32,000 | 45 | 99 | <10 | 97 |
| Myoglobin(68) | 4,500 | 18 | 99 | <10 | 98 |
| γ-globulin(74) | 5,600 | 20 | 99 | <10 | 97 |
| Cytochrome C(106) | 1,500 | 15 | 99 | <10 | 98 |
2 ml dung dịch protein (1 mg/ml, LPS: trộn trong nhiều loại thuốc thử protein khác nhau) được thêm vào 0,3 ml ET sạch Có thể quy đổi thành 1 đơn vị nội độc tố (EU) = 250pg LPS ET Clean S có tỷ lệ loại bỏ tuyệt vời và ET Clean L có lượng loại bỏ tuyệt vời
Giới thiệu ví dụDữ liệu ứng dụng
Loại bỏ nội độc tố khỏi BSA bằng ET Clean L
Điều kiện hoạt động
- Cột
- 1 X 1,1 cm (ID) (1,1ml)
- Tốc độ dòng chảy
- 0,17 ml/phút (10 cm/giờ)
- Bộ đệm hấp phụ
- 50 mM PB, pH 7 + 0,15 mol NaCl aq
Phương pháp đo
- Đạm
- Máy quang phổ hấp thụ 280 nm
- Nội độc tố
- Kiểm tra LAL
- Mẫu tiêm (150 ml)- BSA 1 mg/ml, nồng độ nội độc tố tăng đột biến 100 EU/ml
Loại bỏ nội độc tố khỏi lysozyme lòng trắng trứng bằng ET Clean L
Điều kiện hoạt động
- Cột
- 10 x 0,9 cm (ID) (9,6 ml)
- Tốc độ dòng chảy
- 0,5 ml/phút (47 cm/h)
- Bộ đệm hấp phụ
- 1mM Tris-HCl, pH 7,3
- Độ dốc
- 0 → 1,0 mol / l NaCl aq
Phương pháp đo
- Đạm
- Máy quang phổ hấp thụ 280 nm
- Nội độc tố
- Kiểm tra LAL
- Mẫu tiêm (1ml): Nồng độ lysozyme 14 mg/ml
Loại bỏ nội độc tố khỏi chuỗi insulin alpha bằng ET Clean L- Mẫu tiêm (1ml): Chuỗi alpha insulin 13 mg/ml, nội độc tố 309 EU/ml
Loại bỏ nội độc tố khỏi transferrin bằng ET Clean L- Mẫu tiêm (1ml): transferrin 13 mg/ml, nội độc tố 2982 EU/ml
Tài liệu tham khảoTài liệu tham khảo
1) M Sakata, M Todokoro, C Hirayama, Công nghệ sinh học Hoa Kỳ Phòng thí nghiệm, 20 (2002) 362) M Todokoro, M Sakata, S Matama, M Kunitake, J Ohkuma, C Hirayama, J Liq Chrom & Liên quan Technol, 25 (2002) 601
- Cellufine™ ET Clean S
- Cellufine™ ET Clean L
