Ionenaustauschchromatographie

Cellufine™ MAX GS

Starker Kationenaustauscher mit optimierter Ligandendichte für Antikörper-Arzneimittelprodukte usw

Cellufine™ MAX S-r,S-h

Starker Kationenaustauscher mit einer Sulfonsäuregruppe

Cellufine™ MAX Q-r,Q-h

Starker Anionenaustauscher mit einer quartären Ammoniumgruppe

Cellufine™ MAX CM

Schwacher Kationenaustauscher mit einer Carboxymethylgruppe

Cellufine™ MAX DEAE

Schwacher Anionenaustauscher mit einer Diethylaminoethylgruppe

Die Cellufine™ MAX-Serie ist ein Chromatographieträger der zweiten Generation von Cellufine™, der bei höheren Fließgeschwindigkeiten verwendet werden kann

Cellufine™ MAX-Basisträger

Zellulose ist ein in der Natur vorkommendes Polysaccharid mit einer kristallinen Molekülstruktur, die sich von amorphen Polysacchariden wie Agarose unterscheidet

REM-Foto des Cellufine™ MAX-Harzes
Abb 1:REM-Foto des Cellufine™ MAX-Harzes
Vergleich der Durchbruchskurven von Thyreoglobulin von Cellufine™ des Typs DEAE
Abb 2:Vergleich der Durchbruchskurven von Thyreoglobulin von Cellufine™ des Typs DEAE

Struktur des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers

Abb

Ligandenstruktur der jeweiligen Qualitätsklasse des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers
Abb 3Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers ligandenstruktur

Merkmale des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers

Die Eigenschaften des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers sind in Tabelle 1 aufgeführt

Loại MAX CM MAX S-r MAX S-h MAX DEAE MAX Q-r MAX Q-h
Tài liệu cơ bản Vernetzte Zellulosepartikel, sửa đổi mit Dextran auf der Oberfläche
Partikelgroße(μm) 40 - 130
Funktionelle Gruppe CM S S DEAE Q Q
Ionenauschkapazität (meq/ml-gel) 0,09 - 0,22 0,09 - 0,21 0,10 - 0,22 0,12 - 0,22 0,10 - 0,20 0,13 - 0,22
10% DBC (mg/ml) Lysozym 220 144 191
Rinderserumalbumin 197 141 225
Menschliches Gammaglobulin 104 131 216 108 74 135
Ổn định pH 2 -13 2 -13 3 -14 2 -12 2 -12 2 -12
Konservierungsmittel 20% Ethanol

Verhältnis der Druckfestigkeit zur Fließgeschwindigkeit von Cellufine™ MAX IEX-Ionenaustauschern

Cellufine™ MAX kann bei hohen Fließgeschwindigkeiten für einen effizienten Betrieb von Bioprozessen eingesetzt werden

Beziehung zwischen Lineargeschwindigkeit und Druck für jede Qualitätsklasse von Cellufine™ MAX
Abb 4Beziehung zwischen Lineargeschwindigkeit und Druck für jede Qualitätsklasse von Cellufine™ MAX
Spalte
Innendurchmesser 30 cm x Höhe 20 cm
Giai đoạn di động
Reines Wasser (20 °C)

Dynamische Adtractionskapazität des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers

Eines der Merkmale des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers sind seine effizienten Stoffübertragungseigenschaften für Zielsubstanzen

Dynamische Adsorbsmenge von Cellufine™ MAX S (veränderte Verweilzeit)
Abb 5Dynamische Adsorbsmenge von Cellufine™ MAX S (veränderte Verweilzeit)
Spalte
Innendurchmesser 5 mm x Höhe 50 mm
Thăm dò
Humanes polyklonales IgG (1 mg/ml)
Sự hấp phụ
cá nóc
10mM Acetate-50mM NaCl (pH 4,3)
Dynamische Adsorbsmenge von Cellufine™ MAX Q (veränderte Verweilzeit)
Abb 6Dynamische Adsorbsmenge von Cellufine™ MAX Q (veränderte Verweilzeit)
Spalte
5 mm ID×100 mm L
Thăm dò
Rinderserumalbumin (1 mg/ml)
Sự hấp phụ
cá nóc
50mM Tris-HCl (pH 8,5)
Dữ liệu về lượng hấp phụ protein của Cellufine™ MAX CM và Cellufine™ MAX DEAE
Abb 7Sự hấp phụ động lực học của Cellufine™ MAX CM và MAX DEAE (veränderte Verweilzeit)
Spalte
Innendurchmesser 5 mm x Höhe 50 mm
Thăm dò
MAX CM Menschliches polyklonales IgG (1 mg/ml)
MAX DEAE Rindererumalbumin (1 mg/ml)
Sự hấp phụ
cá nóc
MAX CM 10mM Acetate (pH 5,6)
MAX DEAE Tris-HCl (pH 8,5) cho BSA
Vergleich der dynamischen Chất hấp phụmenge zwischen Cellufine™ MAX S und einem handelsüblichem Agarose-Träger
Abb 8Vergleich der dynamischen Chất hấp phụmenge zwischen Cellufine™ MAX S und einem handelsüblichem Agarose-Träger
Fließrate
Verweilzeit 1 phút
Polyklonales IgG
10mM Acetat (pH 4,3) – 50mM NaCl
Rinderserum
albumin
10mM Acetat (pH 4,3) – 50mM NaCl
Lysozym: Tris-HCl (pH 9,5)

Modellproteintrennfähigkeit des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers

Beispiele für die Modellproteintrennung unter Verwendung der jeweiligen Qualitätsklasse des Cellufine™ MAX-Ionenaustauschers sind in Abb, 9 và 10 dargestellt

Modellproteintrennnung von Cellufine™ MAX Sh và MAX CM
Abb 9Modelllproteintrennung von Cellufine™ MAX Sh và MAX CM
Spalte
Innendurchmesser 6,6 mm x Höhe 50 mm
Nóc A
10mM Phốt phát (pH 7)
Nóc B
110 mM Phosphatpuffer (pH 7) + 1 M NaCl (0→50 % gradient tuyến tính)
Fließrate
0,86 ml/phút (Verweilzeit: 2 phút)
Eiweiß
Ribonuklease A (5 mg/ml),
Cytochrom C (2,5 mg/ml),
Lysozym (1,5 mg/ml)
Injektionsmenge
1,5ml
Modellproteintrennnung von Cellufine™ MAX Qh và MAX DEAE
Abb 10Modellproteintrennnung von Cellufine™ MAX Qh và MAX DEAE
Spalte
Innendurchmesser 6,6 mm x Höhe 50 mm
Nóc A
50mM Tris-HCl (pH 8,5)
Nóc B
50 mM Tris-HCl (pH 8,5), 1 M NaCl (0→75 % gradient tuyến tính)
Fließrate
0,86 ml/phút (Verweilzeit: 2 phút)
Eiweiß
Transferrin (5 mg/ml),
Rinderserumalbumin (10 mg/ml),
Pepsin (5 mg/ml)
Injektionsmenge
1,5ml

Chemische Stabilität und Reinigung vor Ort

Zellulose là một chất hóa học và ổn định vật lý Substanz

Cellufine™ MAX GSist ein neuer Chromatographie-Füllstoff für einen starken Kationenaustausch mit optimierter Ligandenkonzentration

Merkmale von Cellufine™ MAX GS

Die grundlegenden Merkmale von Cellufine™ MAX GS sind wie folgt

Basisträger Hochvernetzte Cellulosepartikel
Partikelgroße 40~130μm
Phối tử -R-SO3-Na+
Ionenaustauschkapazität (m mol / ml) 0,09〜0,15
Lysozym-Hấp phụ (mg / ml) ≧ 100
Chất hấp phụ động lực học của polyklonalem IgG bei 10 % Durchbruch (mg / ml) ≧ 70
Betriebsdruck < 0,3 MPa
Độ ổn định pH pH 2 ~ 13

Fließgeschwindigkeitseigenschaften von Cellufine™ MAX GS

Cellufine™ MAX GS wurde in eine Säule mit einem Innendurchmesser von 30 cm und einer Höhe von 20 cm gefüllt und der Druckverlust gemessen (Abb 1)

Dữ liệu đặc tính tốc độ dòng chảy của Cellufine™ MAX GS, dữ liệu của cột lớn có đường kính trong 30 cm
Abb 1
Spalte
Innendurchmesser 30 cm x Höhe 20 cm
Giai đoạn di động
Reines Wasser (24°C)

Trennebarkeit von Modellproteinen

Cellufine™ MAX GS zeigt eine hervorragende Leistung bei der Entfernung von Antikörperaggregaten, indem die NaCl-Konzentration oder die pH-Bedingungen geändert werden

Trenneigenschaften von polyklonalen Antikörpern und Aggregaten von Cellufine™ MAX GS
Abb 2a
Thăm dò
Säure-/hitzedenaturiertes polyklonales IgG
Nóc
Essigsäure (pH 5,0), 50 mM → 1 M NaCl
Injektionsmenge
1ml
Polyklonale IgG-Konzentration
2 mg/ml
Daten zur monoklonalen Antikörper- und Dimertrennung von Cellufine™ MAX GS
Abb 2b
Spalte
Innendurchmesser 5 mm x Höhe 50 mm
Nóc
Citratpuffer (pH 5,0)
Gradient NaCl
0,2→0,5 M
Injektionsmenge des monoklonalen Antikörpers
1ml
Fließrate
0,66 ml/phút

Dynamische Adsorbsmenge von Cellufine™ MAX GS

Cellufine™ MAX GS Verwendet einen Träger mit hoher Porendiffusionsrate und weist daher eine hervorragende dynamische Adtractionskapazität (DBC) auf

Cellufine™ MAX GS-Proteinadsorbsmenge, Chất hấp thụ polyklonaler Antikörper
Abb 3
Bedingungen
Spalte
Innendurchmesser 5 mm x Höhe 5 cm
Polyklonale IgG-Konzentration
1 mg/ml
Sự hấp phụ
cá nóc
10mM Tinh chất (pH 5,0) + 50mM NaCl

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